中壓層析柱的層析技術(shù)和過柱的技巧
更新時間：2022-04-08 點擊次數(shù)：2387
中壓層析柱是凝膠層析技術(shù)中的主體，一般用玻璃管或有機(jī)玻璃管。根據(jù)樣品混合物中各組分在固定相和流動相中分配系數(shù)不同，從而分離的一種層析法。它的直徑大小不影響分離度，樣品用量大，可加大柱的直徑，一般制備用凝膠柱，但在加樣時應(yīng)將樣品均勻分布于柱床面上。此外，直徑加大，洗脫液體體積增大，樣品稀釋度大。分離度取決于柱高，為分離不同組分，柱床必須有適宜的高度，分離度與柱高的平方根相關(guān)。
中壓層析柱過柱的技巧：
按過柱時的壓力可以分為：加壓，常壓，減壓。壓力可以增加淋洗劑的流動速度，減少產(chǎn)品收集的時間，但是會減低柱子的塔板數(shù)。所以其他條件相同的時候，常壓柱是效率較高的，但是時間也較長，例如一些天然化合物的分離，有時一個柱子過幾個月也有可能。
減壓柱能夠減少硅膠的使用量，但是由于大量的空氣通過硅膠會使溶劑揮發(fā)，有時會在柱子外面有水汽凝結(jié)，另外有些比較易分解的東西可能得不到，而且還必須同時使用水泵抽氣，噪音大，時間長，所以減壓過柱用得比較少。
加壓過柱是一種比較好的方法，與常壓柱類似，但用外加壓力可以使淋洗劑走的快些。壓力的提供可以是壓縮空氣，雙連球或者小氣泵（用魚缸供氣的加壓泵就行）。特別是在容易分解的樣品的分離中很適用。
一般壓力不可過大，不然溶劑走的太快就會減低分離效果。因為加壓過柱效率高，分離效果較好，所以加壓過柱在普通的有機(jī)化合物的分離中是非常適用的。
一些低沸點溶劑裝柱時往往會在柱子中產(chǎn)生氣泡，使柱子變花，利用加壓過柱法在裝柱時就可以有效地解決這個問題，而且可以使柱子很快裝實。
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